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·前言 以外泌體為代表的細(xì)胞外囊泡是各個(gè)細(xì)胞釋放出的膜囊泡,它作為細(xì)胞間信息傳遞的使者和疾病生物標(biāo)志物,近年來受到了極高的關(guān)注*1)。雖然幾年有關(guān)外泌體的研究在各領(lǐng)域中不斷增長(zhǎng),但實(shí)驗(yàn)技術(shù)尚在發(fā)展階段,還存在很多需要改善的問題。FUJIFILM Wako開發(fā)了一種新的親和分離法——“PS親和法”,與傳統(tǒng)方法相比,能從各種樣品中提取出完整且高純度的外泌體,而且,該技術(shù)還成功開發(fā)出用于外泌體檢測(cè)的...
近來關(guān)于細(xì)胞外RNA(exRNA)和細(xì)胞外泌體(EV)報(bào)道的涌現(xiàn),凸顯了外泌體及其內(nèi)含物作為疾病和治療靶標(biāo)的生物標(biāo)志物的潛力,其中最突出應(yīng)用集中在在腫瘤學(xué)領(lǐng)域。目前越來越多的科研經(jīng)費(fèi)注入到EV的研究中來。 長(zhǎng)久以來,雖然已有一些研究標(biāo)明目前不同儲(chǔ)存條件對(duì)外泌體存在影響,但外泌體保存條件的標(biāo)準(zhǔn)仍未定義有統(tǒng)一定論。上海交通大學(xué)研究了不同pH、溫度和凍融次數(shù)等儲(chǔ)存條件對(duì)外泌體的數(shù)量變化和細(xì)胞攝...
莫能菌素鈉(Monein.sodium salt)是一種抗生素,行駛Na+離子載體的功能。莫能菌素鈉的功能包括能阻止糖蛋白的分泌,通過細(xì)胞周期停滯和凋亡抑制幾種淋巴瘤細(xì)胞系的增殖,以及阻止神經(jīng)酰胺通過高爾基體轉(zhuǎn)運(yùn)等。圖1莫能菌素鈉結(jié)構(gòu)式 細(xì)胞內(nèi)的多泡體(MVBs)是一種由細(xì)胞內(nèi)吞形成的結(jié)構(gòu),其中包含著許多通過將內(nèi)體膜發(fā)芽到隔室腔中而形成的小囊泡。MVBs與質(zhì)膜的融合后向細(xì)胞外分泌外泌體...
·試劑盒規(guī)格、功能Q1-1:本試劑盒中含有外泌體檢測(cè)用的抗體嗎?A1-1:本試劑盒中不含外泌體檢測(cè)用的熒光標(biāo)記抗體。熒光素結(jié)合抗CD63抗體(產(chǎn)品編號(hào):018-27641)和紅色熒光色素結(jié)合抗CD63抗體(產(chǎn)品編號(hào):011-27751),或者其他合適的熒光標(biāo)記抗體需另行購(gòu)買。Q1-2:可以使用熒光標(biāo)記二抗進(jìn)行檢測(cè)嗎?A1-2:可以,分離外泌體后,按照以下操作進(jìn)行一抗反應(yīng)、二抗反應(yīng)和游離細(xì)胞計(jì)數(shù)法分...
·試劑盒規(guī)格、功能Q1-1:一定要制備標(biāo)準(zhǔn)品嗎?制備標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),是否必須使用MagCapture?外泌體提取試劑盒PS?A1-1:定量檢測(cè)時(shí),需要制備作為標(biāo)準(zhǔn)品的細(xì)胞外泌體。超速離心法和聚合物沉淀法等提取的細(xì)胞外泌體也可作為標(biāo)準(zhǔn)品,但還是推薦使用與檢測(cè)原理相同的PS親和法提取的細(xì)胞外泡作為標(biāo)準(zhǔn)品。(詳細(xì)制備方法請(qǐng)參考MagCapture?外泌體提取試劑盒PS的使用說明書)。Q1-2:為什么沒有配套的...
Anti Asialo GM1的抗血清可以與NK細(xì)胞(自然殺傷細(xì)胞)結(jié)合,抑制NK細(xì)胞非特異性殺傷靶細(xì)胞的活性。靶細(xì)胞包括腫瘤細(xì)胞,同種異體移植的器官、組織等。可用于藥物篩選、器官移植、自身免疫疾病研究等。NK細(xì)胞屬于天然免疫細(xì)胞,具有免疫監(jiān)視功能。 特異性:小鼠、大鼠的NK細(xì)胞,小鼠單核細(xì)胞(不含有NK細(xì)胞的肝臟細(xì)胞,骨髓,胎兒肝臟細(xì)胞,裸鼠巨噬細(xì)胞的脾細(xì)胞),胎兒T淋巴細(xì)胞(12天)...
Phos-tag? SDS-PAGE是使用了Phos-tag? Acrylamide或SuperSep的SDS-PAGE。可通過條帶的遷移率差異,指示磷酸化蛋白的磷酸化水平。·特點(diǎn)·SDS-PAGE的條帶根據(jù)蛋白的磷酸化水平變化·Phos-tag?的支持文獻(xiàn)眾多·Phos-tag? SDS-PAGE的原理1.SDS-PAGE膠中的Phos-tag? 捕獲磷酸化蛋白。2.電泳中的磷酸化蛋白的...
·評(píng)價(jià)ULTRARIPA Kit B buffer單獨(dú)提取脂籬蛋白的能力(數(shù)據(jù)提供:東京大學(xué)大學(xué)院藥學(xué)系研究科衛(wèi)生化學(xué)教室) 用PBS清洗COS-1細(xì)胞后,用SDS buffer、1%Triton X-100 buffer,ULTRARIPA Kit A buffer以及ULTRARIPA Kit B buffer溶解,離心(14,000rpm,5min,4°C)。分離可溶性組分和不溶性組分...
·實(shí)驗(yàn)材料及方法材料的獲取:1年齡小鼠的上、下肢骨以及脊椎骨(切除軟組織)一次固定:4%多聚甲醛溶液·10%福爾馬林溶液二次固定:純乙醇部分脊椎骨的非脫鈣GMA樹脂包埋處理,其他部分做脫鈣處理。↓脫脂、脫鈣:脫鈣液是ZnSO4加EDTA溶液。(與其它方法相比)脫鈣裝置Histra-DC(普通光)8~16℃連續(xù)操作。↓脫水、包埋:ETP(Sakura產(chǎn)品)處理16小時(shí),使用點(diǎn)為58-60℃嵌入式硬石...
“在細(xì)胞培養(yǎng)的路上,有多虐心就有多少需要值得注意的地方。小小的瓶皿之中,細(xì)胞點(diǎn)點(diǎn),引無數(shù)英雄競(jìng)掛東南枝。正所謂“萬(wàn)事開頭難”,即便是細(xì)胞復(fù)蘇與保存這兩件看似簡(jiǎn)單的事情,也能造成實(shí)驗(yàn)汪內(nèi)心無比巨大的陰影面積。”在2016年10月一篇名為:實(shí)驗(yàn)新人必讀:細(xì)胞培養(yǎng)那些事兒。詳細(xì)闡述了細(xì)胞凍存相關(guān)問題。引起了細(xì)胞生物學(xué)的重視。 在細(xì)胞凍存中存在三大問題。一、凍存液的配方...